Esterilización Y Desinfección

Esterilización

Es el proceso de destrucción de todas las formas de vida de un objeto o material incluyendo las endosporas.

Desinfección

Proceso  de  destrucción  de  formas  vegetativas  de  microorganismos patógenos.

Desinfectante

Producto  químico  que  se  aplica  para  la  desinfección  de  objetos  y materiales inertes.

Antiséptico

Producto  químico  que  se  aplica  para la  desinfección  de  tejidos  vivos

(heridas, mucosas).

Antisepsia

Conjunto de prácticas que impiden la infección. (Desinfección de tejidos.)

Asepsia

Técnica diseñada para prevenir la entrada de microorganismos patógenos en el organismo.

Agente germicida

Agente o sustancia que destruye gérmenes. Dependiendo del tipo de gérmenes recibe diferentes nombres:

Bactericida

Destruye bacterias.

Fungicida

Destruye hongos.

Algicida

Si mata algas microscópicas.

Viricida

Si mata virus.

Amebicida

Si mata  protozoos microscópicos (amebas).

Microbiostasis

Proceso   que   inhibe   el   crecimiento      y   la   multiplicación   de microorganismos.

Microbiostático

Agentes que se utilizan para la microbiostasis.

Bacteriostático

Productos que inhiben el crecimiento y multiplicación de bacterias.

Métodos DE Esterilización

1-  MÉTODOS FÍSICOS

ESTERILIZACIÓN POR CALOR

El calor mata a los microorganismos por desnaturalización de sus proteínas.

A) Calor húmedo:

Autoclave

– Utiliza vapor de agua saturado a una presión superior a la atmosférica.  Este  vapor  se genera en una cámara cerrada  herméticamente  que contiene en su fondo agua, y sobre ella una rejilla para disponer el material   a esterilizar.

La  relación existente entre  Tª y Presión en una atmósfera saturada de agua es:

Presión  en atmósferas                 Tª Cº                              Tiempo (minutos)

0,5                                      112                                   30 ‘

1                                        121                                   20’

Se utiliza para esterilizar medios de cultivo, soluciones,  etc.

Las condiciones de trabajo más usuales son  1 atmósfera de presión, 121 ºC y 20 minutos. También hay que tener en cuenta el volumen del material a esterilizar, volúMenes grandes requieren tiempos mayores.

El autoclave puede ser utilizado también para la esterilización por vapor fluente y tindalización.

Esterilización por vapor fluente.-

Se realiza en el autoclave con la llave de purga abierta, por lo cual no sobrepasa los 100ºC. El proceso requiere 1 hora. Se aplica para  esterilizar materiales o sustancias termolábiles.

Tindalización

-También llamada esterilización fraccionada o por calor intermitente.  Consiste  en  realizar  varios  calentamientos  (100  ºC  de  10  a  15 minutos) separado entre sí por   periodos de incubación del material. En el calentamiento mueren las células vegetativas.

Durante la incubación germinan las esporas originando células vegetativas que a su vez mueren en el calentamiento posterior.

B) Por calor seco

El aire seco es peor conductor del calor que el vapor de agua por lo que en este tipo de esterilización se requieren Tª mas elevadas y tiempos mayores. Se aplica al material   que se puede deteriorar por la humedad y que además resisten altas temperaturas, como material de vidrio, porcelana, etc.

Horno  Pasteur

–  Son  cámaras  cerradas  en  cuyo  interior  existen    baldas  o rejillas para disponer el material: La fuente de calor es eléctrica. La   Tª y los tiempos de esterilización mas usuales son :

Tª en ºC                   Tiempo

140 ºC                        180’

150  ºC                        150’

160 ºC                         120’

170 ºC                          60’

Al utilizar el horno Pasteur ha de tenerse en cuenta lo siguiente: El material de vidrio debe estar:

–  Seco para evitar rotura.

– Limpio pues los restos de suciedad incinerados pueden actuar como sustancias inhibidoras del crecimiento bacteriano.

– Perfectamente envuelto en papel de aluminio o confitero para evitar su posterior contaminación, en el caso de las pipetas pueden utilizarse cilindros de acero inoxidable.

Flameado

– Es la exposición directa de material a la llama de un mechero se aplica a las asas de siembra, pinzas, bocas de matraces y tubos, puntas de pipeta etc. Es un método eficaz de esterilización pero presenta como inconveniente el gran deterioro que sufre el material y la recontaminación.

ESTERILIZACIÓN A TEMPERATURA AMBIENTE Esterilización por filtración

Consiste en hacer pasar líquidos a través de filtros que retienen a las bacterias en función  del  pequeño  diámetro  del  poro.  Se  aplica  a  material  termolábil  como antibióticos, soluciones de azúcares…

Se utilizan los filtros de membrana distribuidos por las casas comerciales. El material filtrante son unos discos de celulosa u otra sustancia polimérica con un poro de tamaño determinado. Los más utilizados son de 0,22 a 0,45 micrómetros, los discos poseen un espesor muy pequeño por lo que se denominan filtros de membrana.

Existen filtros de diferente tamaño dependiendo fundamentalmente del volumen de muestra que se desea esterilizar. La utilización de los filtros requieren soportes a los cuales se aplica, de un lado el recipiente contenedor de la solución que se desea esterilizar y del otro , un recipiente estéril para recoger la solución una vez filtrada. Este último puede ir conectado a una bomba de vacío para facilitar la filtración.

Esterilización por radiaciones ionizantes

Es la denominada esterilización en frío o radioesterilización, se utilizan radiaciones gamma que producen una inactivación del genoma (conjunto de genes) bacteriano y de las enzimas, como consecuencia se produce la muerte de las bacterias. La fuente más utilizada de radiación gamma es el cobalto 60. Se emplea para esterilizar material desechable o de un solo uso como medicamentos, antibióticos. Se emplea en la industria ya que necesita unas instalaciones especiales.

2- MÉTODOS QUÍMICOS

Esterilización por óxido de etileno o gaseosa

El gas utilizado es el óxido de etileno (CH3-O-CH3), sustancia muy penetrante y activa frente  a  bacterias,  hongos  y  virus.  Actúa  introduciendo  radicales  extraños  en  las proteínas de las bacterias desnaturalizándolas y provocando la muerte celular. Es  un gas tóxico y explosivo por lo que hay que emplearlo con determinadas precauciones.

Se debe utilizar en una cámara cerrada, mezclado con CO2 en proporción de un 5% de óxido de etileno para evitar su poder explosivo, con un grado de humedad del 40 al 60% y la temperatura de aplicación es de 20 a 45 º C. El tiempo requerido es de 3 a 12 horas. Se utiliza para esterilizar material de un solo uso como catéteres, pinzas…

CONTROLES DE ESTERILIZACIÓN

Para comprobar el buen funcionamiento del método utilizado es necesario realizar controles periódicamente, pueden ser de tres tipos: físicos, químicos y biológicos

1) Controles físicos:

Se utilizan tubos que contienen sustancias que funden a una temperatura conocida y un colorante que tras la fusión de dicha sustancia podrá difundir a través de ella. Ejemplo, el azufre cuya temperatura de fusión es de 115 ºC y la fuschina.

2) Controles químicos:

Se utilizan productos químicos o papeles indicadores que a una determinada temperatura cambian de color.

DESINFECCIÓN

La desinfección puede ser microbiocida o microbiostática según mate o inhiba el crecimiento microbiano. A diferencia de los quimioterápicos ( antibióticos.) es activa frente a una gran gama de microorganismos .

Existen una serie de factores que varían la potencia de un desinfectante:

1-  Concentración de desinfectante

2-  Tiempo de exposición

3-  El ph

4-  La Tª a la que se aplica

5-  La naturaleza de la célula microbiana que se quiere matar o inhibir

6-  La fase de crecimiento del microorganismo, la fase logarítmica es la mejor

7-  Si presenta cápsula, endosporas..

8-  La  presencia  de  sustancias  inhibidoras  o  antagónicas  del  desinfectante.  El NH4 + se inhibe con jabones.

MÉTODOS DE DESINFECCIÓN FÍSICOS

Ebullición:

Destruye la mayor parte de formas patógenas, pero no algunas endosporas y virus de la hepatitis.

Rayos UV

Actúan dañando la molécula de ADN. Se utilizan las radiaciones producidas por lampara de Hg en la preparación de vacunas, cabina de siembra en laboratorios, en salas de prematuros, infecciosos. Hay que tener la precaución de protegerse los ojos y manos cuando se manejan radiaciones UV para prevenir la conjuntivitis y dermatitis que pudieran producirse.

QUÍMICOS

A) Actúan sobre la membrana celular alterando su estructura

1) Desinfectantes activos de superficie: catiónicos y aniónicos

Catiónicos:

Son compuestos de amonio Cuaternario (NH4+), tienen una actividad muy alta a ph alcalino. Son bactericidas para una gran gama de microorganismos G+ y G- .

Aniónicos (jabones). Son detergentes tipo jabón y son más activos a ph ácido. Suelen ser mas eficaces frente a bacterias G + y menos frente a G-.

Ambos  catiónicos  y  aniónicos  no  se  pueden  utilizar  conjuntamente  porque  se neutralizan

2) Compuestos fenólicos Son muy abundantes

Fenol:

Es un agente químico muy potente, pero también muy tóxico, por lo que no se utiliza. Solo se utiliza para valoración de nuevos desinfectantes (índice de fenol).

Hexaclorofeno:

Con actividad bacteriostática frente a cocos G+, se utiliza en preparados como jabones, lociones, dentífricos.

3) Alcoholes

Etanol:

Se utiliza como antiséptico de la piel.