Gamma-glutamil transferasa (γ-GT)

Elevada en cáncer de hígado, carcinomas hepáticos y en caso de obstrucciones hepáticas. Esta gamma-GT es más específica que la fosfatasa alcalina, sirve para complementar los resultados de esta. Si están aumentadas las dos, orientan hacia un problema hepático. Pero si solo aumenta la fosfatasa alcalina, puede derivar al hueso. También suele medirse de manera independiente en un tratamiento en personas alcohólicas. Para su determinación, tiene una absorbancia de 410 nm y es directamente proporcional a la actividad enzimática.

Lactato deshidrogenasa (LDH)

Elevadas en caso de obstrucciones hepáticas. Tiene una amplia distribución y poca especificidad. Al tener amplia distribución, puede estar formada por dos subunidades. Tiene 5 enzimas, y cada una formada por 4 subunidades.

La LDH1 es predominante en el corazón, y la LDH5 es la que se encuentra en el músculo esquelético. Las LDL intermedias, se encuentran en otros tejidos.

Para determinar la actividad: Mido la desaparición del NADH. La cantidad enzimática es inversamente proporcional a la absorbancia. Sin pH ácido, con alcalino o neutro.

La 5-nucleotidasa (5-NT) y la leucina aminopeptidasa (LAP)

Son enzimas complementarias. Sirven para confirmar. Están aumentadas en las patologías hepáticas. 5-nucleotidasa (5-NT) es una enzima que quita un grupo fosfato a los nucleótidos, convirtiéndolos en nucleósidos. Para su determinación se mide la desaparición de NADH (descenso de absorbancia a 340 nm). Es inversamente proporcional.

Enzimas asociadas a patologías pancreáticas

α-amilasa

Rompe moléculas de glucógeno y almidón para formar azúcares simples. Hay dos isoenzimas, la salival y la pancreática. Aumenta en pancreatitis agudas.

Para medir la actividad en suero, hay varios métodos:

• Los cariogénicos. Mide la aparición de glucosa mediante reacciones enzimáticas acopladas.
• Los cromogénicos. Miden el incremento de color que se libera durante la hidrólisis de un sustrato. Se obtiene un método directo.

No puede utilizarse un plasma con EDTA, ya que es un quelante y el calcio es necesario para hacer la medición. El más empleado es la inhibición selectiva (mediante anticuerpos monoclonales, que inactivan la saliva pero no la pancreática).

Lipasa

Hidroliza los ésteres de glicerol. Separa el glicerol de los ácidos grasos. Para poder actuar, necesita un cofactor, la colipasa, y además, sales biliares.

Para su determinación:

• Titulación de ácidos grasos con NaOH. Utilizando NaOH, que junto con ácidos grasos, se da la saponificación. Es directamente proporcional. En estos métodos, extraer una cantidad de sangre a la que añado una concentración conocida de triglicéridos.
• Secuencias enzimáticas acopladas. Utilizamos un sustrato que genera una serie de productos, que en otra reacción acoplada, genera un producto coloreado, metilresorufina, con determinada absorbancia.

Enzimas asociadas a patologías cardíacas y musculares

Creatinina kinasa

Es una enzima citosólica asociada a estructuras miofibrilares. Cataliza la fosforilación dependiente de ATP de la creatina, para dar lugar a fosfocreatina. Esta, se utiliza como reservorio energético. Está formada por dos cadenas de polipéptido que se combinan de tres maneras diferentes.

Si hay un aumento sugerirá una lesión en el cerebro, en el corazón o en el músculo esquelético. La determinación, debe hacerse a un pH de 6.8, y se mide la hidrólisis de la fosfocreatina acoplada a 2 reacciones enzimáticas.

Siempre debe hacerse en suero preferentemente, y si es en plasma debe ser heparinizado.

Otras enzimas de interés diagnóstico clínico

Fosfatasa ácida

Es una hidrolasa situada en la membrana celular, y requiere un ambiente ácido. Existen 5 isoenzimas diferentes: la 1 es específica de próstata y la 5 es de osteoclastos.

Para determinar la fosfatasa ácida, se utilizan los mismos métodos que la fosfatasa alcalina pero en medios ácidos. La actividad de la fosfatasa ácida prostática se halla restando la fosfatasa ácida total menos la fosfatasa ácida tartrato resistente.

Enzima convertidora de angiotensina (ACE)

Se encuentra en los capilares pulmonares y se utiliza para el diagnóstico de la sarcoidosis pulmonar y para el control de los inhibidores ACE en la hipertensión.

Adenosindeaminasa

Se puede medir porque existen valores elevados en cirrosis y tuberculosis.

Glucosa-6-fosfato deshidrogenasa

Es una enzima de la ruta de la glucólisis.

Renina plasmática

Tiene una importante función en regular la secreción/formación de orina.

Aldolasa

Es una enzima típica de la ruta de la glucólisis. Para medir la actividad de la aldolasa, se realizan tres reacciones acopladas. En la tercera reacción es en la que medimos la desaparición de NADH a una absorbancia de 340 nm. Se utiliza poco, ya se prefiere la creatinina kinasa.